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免疫熒光技術(shù)-間接法
發(fā)布時(shí)間： 2021-10-26 點(diǎn)擊次數(shù)： 1711次材料與儀器：抗體
PBS 伊文氏蘭
顯微鏡實(shí)驗(yàn)步驟：1. 標(biāo)本固定后，PBS洗滌3x3 分鐘；
2. 滴加一抗，37 ℃40 分鐘或4 ℃過夜；
3. PBS洗3x3 分鐘；
4. 滴加熒光標(biāo)記二抗37 ℃，40 分鐘；
5. PBS洗3x3 分鐘；
6. 0.1 %伊文氏蘭復(fù)染；
7. PBS洗3x3 分鐘；
8. 緩沖甘油封片，鏡檢。
要點(diǎn)：1.種屬在進(jìn)行雙重免疫標(biāo)記時(shí)，要選擇來源于兩種不同種屬動(dòng)物的一抗，如選擇來源于rabbit和mouse的抗體，二抗則用帶有不同熒光素標(biāo)記的，如抗rabbit或抗mouse二抗， FITC和Tex-Red;2.孵育時(shí)間和溫度相同的兩種一抗可以同時(shí)孵育，然后加入相對(duì)應(yīng)的一抗的二抗進(jìn)行孵育，一抗孵育時(shí)間室溫至少需要16h,二抗孵育室溫不宜超過4h,選擇4℃孵育比較好，背景比較清晰，另外孵育時(shí)夏天特別注意室溫溫度；3.抗體稀釋液通常第一抗體選擇1%牛血清白蛋白進(jìn)行稀釋，第二抗體選擇用0.01mol/L的PBS稀釋。
產(chǎn)品中心
Products
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血清系列
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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支原體清除
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細(xì)胞凍存
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實(shí)驗(yàn)耗材
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分子試劑
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細(xì)胞增殖與凋亡
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Biozellen系列
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培養(yǎng)基
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ELISA試劑盒
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TOYOBO（東洋紡）
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ZYMO RESEARCH
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Greiner（格瑞納）
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IKA（艾卡）
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化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
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PROSPEC系列
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Epigentek系列
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微生物檢測(cè)
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細(xì)胞生物學(xué)
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Corning康寧
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解離試劑
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細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
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原代細(xì)胞
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植物檢測(cè)系列試劑盒
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SERANA
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細(xì)胞系
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生化試劑盒
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環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
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類器官培養(yǎng)
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緩沖器和解決方案
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生物三凝膠基質(zhì)
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細(xì)胞因子分子
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生物樣本庫
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蛋白研究系列
