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考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)

考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)

簡(jiǎn)要描述:
考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)
用途
用于考馬斯亮藍(lán)法的蛋白定量檢測(cè)。
簡(jiǎn)單便捷、靈敏度高;

更新時(shí)間:2025-07-02

訪問量:444

廠商性質(zhì):代理商

生產(chǎn)地址:

考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)

產(chǎn)品介紹


1. 產(chǎn)品描述:

考馬斯亮藍(lán)蛋白定量法又稱Bradford法,是蛋白質(zhì)快速定量方法之一。考馬斯亮藍(lán)(Coomassie brilliant blue G-250)與蛋白質(zhì)結(jié)合后染料的最大吸收峰由465 nm變?yōu)?95 nm,溶液的顏色由棕色變?yōu)樗{(lán)色,在595 nm波長(zhǎng)下測(cè)定的吸光度值與蛋白含量成正比。靈敏度比Lowry法高4倍,與BCA法相當(dāng)。反應(yīng)迅速,2 min達(dá)到平衡并在1 h內(nèi)保持穩(wěn)定。操作簡(jiǎn)便,只需要一種反應(yīng)試劑。干擾物質(zhì)少,K+、Na+、Mg2+離子、Tris、葡萄糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、(NH4)2SO4、乙醇、EDTA等均不干擾此測(cè)定法。本試劑盒采用改良考染法和優(yōu)化的試劑組成以及優(yōu)化的測(cè)定方案,可對(duì)0.5~2000 µg/mL濃度范圍的蛋白進(jìn)行線性檢測(cè),顯著提高了蛋白檢測(cè)靈敏度。


2. 產(chǎn)品特點(diǎn):

(1)簡(jiǎn)單便捷、靈敏度高;

(2)線性標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0.5~50、5~500和50~2000 µg/mL;

(3)不受大部分金屬離子或螯合劑影響。


考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)

使用說明


1. 產(chǎn)品組分:

考染法蛋白定量試劑盒(蛋白制備)

注:配套5 mg/mL的BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,貨號(hào)AC0238:-20℃保存,有效期為12個(gè)月。

2. 儲(chǔ)運(yùn)條件:

考馬斯亮藍(lán)溶液置于2~8℃保存,有效期12個(gè)月,2~8℃運(yùn)輸;

配套的BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,置于-25~-15℃保存,有效期12個(gè)月,干冰運(yùn)輸。

3. 注意事項(xiàng):

(1)分別在595 nm和450 nm測(cè)定OD值,計(jì)算OD594/OD450,以此代替原有的OD595作圖,可明顯提高檢測(cè)的精確度和靈敏度約10倍,顯著提高測(cè)定的線性關(guān)系,并降低去垢劑的影響。在進(jìn)行超敏感度測(cè)定時(shí)可考慮此法;

(2)主要干擾物質(zhì)的終濃度:SDS<0.002%;Triton X-100<0.1%;Tween-20/60/80<0.015%;NaOH<0.1 N;

(3)蛋白-染料結(jié)合物在1 h內(nèi)保持穩(wěn)定,但在5~20 min內(nèi)穩(wěn)定性最好,因此應(yīng)盡快測(cè)定。如果放置過久將出現(xiàn)沉淀,或使測(cè)定結(jié)果偏低;

(4)染料不結(jié)合精氨酸、賴氨酸及分子量小于3 kDa的短肽,所以不同的蛋白質(zhì)由于精氨酸和賴氨酸含量不同會(huì)出現(xiàn)小范圍的測(cè)量偏差;小于3 kDa的短肽純品不能用此方法測(cè)定;

(5)蛋白-染料結(jié)合物附著在石英比色皿后難以洗去,因此不宜使用石英比色皿。可用玻璃或塑料比色皿,用后立即用95%乙醇或洗滌劑浸泡洗滌。塑料比色皿不可用乙醇長(zhǎng)時(shí)間浸泡;

(6)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該每次新做。但每一稀釋度的BSA標(biāo)準(zhǔn)品可預(yù)先配好-20℃凍存?zhèn)溆茫⒁庠谑褂眠@種非新鮮配制的BSA時(shí),如果發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的某一些點(diǎn)偏差較大,說明稀釋的BSA已經(jīng)壞掉應(yīng)予重配。







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